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子宫内膜、正常早孕及原因不明复发性流产患者蜕膜上Foxp3表达的(2)

时间:2013-08-20 10:41来源:核心期刊网 作者:唐碧婷 点击:
1.2研究方法 蜕膜组织均在手术后进行采集,使用4%多聚甲醛液进行固定,固定时间为24~48h,常规脱水、石蜡包埋,每个标本均做3m片厚的连续切片,常规HE染色,对蜕膜形态进行观察。对蜕膜Foxp3表达进行观察的方法为S
  1.2研究方法
  蜕膜组织均在手术后进行采集,使用4%多聚甲醛液进行固定,固定时间为24~48h,常规脱水、石蜡包埋,每个标本均做3μm片厚的连续切片,常规HE染色,对蜕膜形态进行观察。对蜕膜Foxp3表达进行观察的方法为S-P免疫组化染色法。其中以具有Foxp3表达的胸腺组织为阳性对照,阴性对照使用TBS代替一抗,为了达到将批内及批间存在的误差降低到最低限度的目的集中切片进行染色。
  1.3结果的判断依据[3]
  结果判断中对阳性反应的观察采用双盲法。Foxp3表达免疫组化阳性信号为棕黄色,位于胞浆,随机抽取每张切片中的10个视野进行观察,以在总细胞中阳性细胞所占的比例为依据将结果分为阴性、可疑阳性、轻度阳性、中度阳性及强阳性5级,具体标准如下:无阳性细胞存在为阴性(-);阳性细胞数低于25%为可疑阳性(±);阳性细胞数介于25%~50%之间为轻度阳性(+);阳性细胞数介于50%~75%之间为中度阳性(++);阳性细胞数高于75%为强阳性(+++)。
  1.4统计学分析
  采用SPSS13.0统计分析软件包进行分析,各个组间数据的分析处理采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
  2结果
  2.1Foxp3的分布与不同组间表达水平的比较
  Foxp3在妊娠后的蜕膜组织及分泌期子宫内膜中均有表达。Foxp3在URSA组的表达与正常妊娠组比较明显较低(P<0.05),Foxp3在分泌期内膜的表达与正常妊娠组及URSA组比较明显较低(P<0.05)。见表1。
  2.2Foxp3在各组中不同分布部位表达水平的比较
  蜕膜间质为URSA组Foxp3的主要表达位置,与同组的蜕膜腺上皮细胞中的Foxp3表达水平比较明显较高(P<0.05);蜕膜腺上皮细胞为正常妊娠组患者Foxp3表达的主要位置,与同组中的蜕膜间质中Foxp3表达水平比较明显较高(P<0.05)。Foxp3在增生期内膜阴性表达主要分布于蜕膜腺上皮细胞,与同组中蜕膜间质中的阴性表达比较差异具有显著性(P<0.05);蜕膜腺上皮细胞为分泌期子宫内膜Foxp3的主要分布位置,与蜕膜间质细胞的分布比较明显较高(P<0.05)。见表1。
  3讨论
  不明原因复发性流产具有复杂的病因,其中主要为同种免疫型RSA,再次发生流产的风险随着临床妊娠丢失次数的增多而加大。正常的妊娠与同种异体移植具有相似性,母体对胚胎的免疫排斥在妊娠失败的原因中占有较重要的位置[4]。有学者研究证明,CD4+CD25+Tr在人胸腺及外周血中天然存在,在人外周血CD4+T细胞中所占的比例约为5%~10%。CD4+CD25+高表达亚群中有人类调节性T细胞存在,而正常活化的T细胞在CD4+CD25+低表达T细胞亚群中占有较高的比例。在人类正常妊娠的孕早期中CD4+CD25+Tr出现明显升高,其达到高峰的时间为孕中期,在产后CD4+CD25+Tr则慢慢地出现降低的趋势[5]。本次结果表明,URSA与正常妊娠组比较具有明显较低的外周血CD4+CD25+Tr细胞数量,结果提示在正常妊娠的维持过程中及病理妊娠的发生过程中CD4+CD25+Tr均具有重要的意义。


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