心可舒片由葛根、山楂、丹参等中药精制而成,是治疗冠心病、高血压、高血脂的常用中成药,其中葛根素是葛根的主要有效成分,对心血管系统有较强的活性。因此,测定葛根素的含量,对控制产品质量,确保临床疗效,具有重要意义。本文建立了薄层荧光扫描法测定葛根素含量的方法,操作简便、结果准确。

　　一、仪器与试药

　　CS-9000双波长飞点扫描(岛津);定量毛细管;SBC-300超声波处理器(济宁市超声波仪器厂);硅胶G(青岛海洋化工厂);试剂均为分析纯;葛根素对照品(中国药品生物制品检定所);心可舒片(山东潍坊中药厂,批号:980618、980738、981016、980205)。

　　二、实验条件的选择

　　（一）薄层条件

　　薄层板制备:硅胶G-0.2%CMC-Na溶液(1∶3),湿法铺板(厚约0.5mm),晾干。105℃活化1h,置干燥器中备用。展开剂:氯仿-甲醇-醋酸乙酯-水(8.1∶9.4∶26∶4)。展开方式及展距:上行展开至14cm。

　　（二）扫描条件

　　单波长荧光反射法线性扫描;激发波长λs=320nm;滤光片3号;光束0.4mm×10.0mm;ΔY=0.02mm;线性参数SX=3;灵敏度中;峰检出方式:峰面积法。

　　三、方法与结果

　　（一）样品溶液制备

　　取心可舒片20片,除去膜衣,精密称重,研细,过60目筛,精密称取约0.3g,置具塞瓶中,精密加甲醇10ml,称定重量,超声处理20min,放置室温,以甲醇补足重量,摇匀,滤过,续滤液作为样品溶液。

　　（二）阴性对照溶液制备

　　取不含葛根的心可舒片细粉约0.3g,按样品溶液制备方法制得阴性对照溶液。

　　（三）对照品溶液制备精密称取葛根素对照品3.45mg,置25ml容量瓶中,加入甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,制得0.138mg/ml的对照品溶液。

　　（四）薄层扫描测定

　　1、稳定性考察

　　精密吸取对照品溶液1μl,点于薄层板上,展开,挥干溶剂(约40min),每隔30min扫描一次,在3h内,峰面积积分值的RSD为1.77%。

　　2、阴性样品对照考察

　　对缺葛根素阴性对照液进行测定。结果在葛根素相应色谱位置无吸收,表明其它成分对葛根素测定无干扰。

　　3、线性关系考察

　　精密吸取葛根素对照品溶液1、2、3、4、5μl,分别点于同一薄层板上,展开,取出,室温放置,挥干溶剂后,扫描测定。以对照品点样量X(μg)为横坐标,斑点峰面积积分值为纵坐标(Y)绘制标准曲线,得一直线,回归方程为Y=696.88+8606.144X,r=0.9996。

　　4、精密度考察

　　精密吸取对照品溶液1μl,分别点同一薄层板上,共6个点。依法展开,扫描测定各斑点峰面积积分值,RSD为1.79%。

　　5、样品测定

　　精密吸取样品溶液2μl对照品溶液2μl、4μl,分别交叉点于同一薄层板上,依法展开,取出,室温放置40min后,扫描测定峰面积积分值。

　　6、加样回收试验

　　精密吸取葛根素对照品溶液(0.2mg/ml)3ml,共5份,分别置具塞瓶中,挥干溶剂,精密称取已知含量的同批号样品约0.15g按样品测定方法测定含量,计算回收率。结果平均回收率为98.93%,RSD为1.78%。

　　四、小结与讨论

　　异黄酮类为葛根的主要有效成分,其中葛根与大豆甙结构相似,二者Rf接近,难以分离,通过对展开剂的优化,结果以本文选定的展开剂分离效果较好。

　　心可舒片是选用活血化淤的中药而研制的复方制剂，已在临床应用于冠心病、心律失常、高血压病等疾病的治疗。本研究通过运动实验及临床指标评价心可舒片对稳定性心绞痛的疗效。

　　五、心可舒片治疗在心绞痛治疗中的应用分析

　　研究对象：将符合WTO冠心病稳定性心绞痛诊断标准的患者96例，年龄(56士7)岁，病程(8士5)年。随机分为心可舒片治疗组(48例，男30例，女18例)和对照组(48例，男33例，女15例)。排除急性心肌梗死、不稳定心绞痛、心力衰竭(NYHA111-1V)，未控制好的高血压患者(血压>160/95mmHg),严重肝、肾功能不全者，频发室早、室速等恶性心律失常者。方法对照组常规应用硝酸酯类药物，血小板抑制剂，β受体阻滞剂/钙拮抗剂，血管紧张素转换酶抑制剂，治疗组在对照组基础上加用心可舒片(山东潍坊中药厂出品)，每次4片，每日3次，连续服用3个月。价指标观察：用药前后心绞痛发作次数、持续时间、重大心血管事件发生率、运动实验的主要观察指标有运动总时间(min)，运动至ST段压低lmm的时间(min)，运动至ST段压低的最大幅度(mm)。统计学处理：计量资料以X±S表示，比较采用t检验。计数资料比较采用x2检验。P<0.05为统计学有显著差异。

　　疗效比较：经3月治疗后，治疗组较对照组每周舌下含服硝酸甘油用量明显减少[分别为:（1.3士1.2）片/周、（3.4士2.2）片/周、P<0.05}。治疗组与对照组心绞痛的发生率分别为3例(6.3%)和5例(10.4%)，P<005急性心肌梗死2例(4.2%)和4例(8.3%)，P<005心力衰竭1例(2.1%)和4例(8.3%)，P<0.01.运动实验结果比较：治疗组与对照组相比，到达运动实验终点的总时间及运动至ST段压低lmm的时间(min)均明显延长(P<0.01)，运动至ST段压低的最大幅度显著减少(p<0.01)。