鲍曼不动杆菌(ABA)是目前医院感染主要致病菌之一。研究表明,近几年来其耐药性迅速增长[1],甚至出现了只对多黏菌素敏感而其他抗生素均耐药的菌株[2],近年来鲍曼不动杆菌的耐药问题逐渐成为学者们关注的焦点。这种日趋严重的耐药现象迫使我们急需一种新的抗菌药物或联合用药来控制和减少耐药菌株产生。大蒜素(allicin)是大蒜的主要成分,有抗菌、消炎及抗病原微生物、抗肿瘤等多种药理作用[3],临床已将其广泛应用于抗感染的治疗。本文在文献研究的基础上通过对大蒜素联合头孢哌酮对多重耐药鲍曼不动杆菌的杀伤效果进行了观察,以期为临床上泛耐药的鲍曼不动杆菌的治疗提供新的视点。
1材料与方法
1.1分离菌株
30菌株临床分离的ABA,均经VITEKCompact细菌鉴定仪鉴定,其中包括15株敏感ABA和15株耐头孢哌酮ABA,排除同一患者同一部位的重复菌株。质控菌为大肠埃希菌ATCC25922。
1.2抗菌药物
大蒜素,批号:H32025640,江苏正大天晴药业股份有限公司;头孢哌酮钠,批号130420-200304,含量96.5%,中国药品生物制品检定所。
1.3培养基与药敏纸片
K-B法检测临床常用药物敏感试验药敏试验方法采用微量肉汤稀释法。药敏纸片均为英国Oxoid公司生产。根据2009年美国临床实验室标准化研究所(CLSI)规定的判断标准判定菌株对抗菌药物的敏感性。
1.4仪器
微量加样器和微量离心管由Eppendorf中国有限公司生产;恒温培养箱由Thermo公司生产;比浊仪,VITEK全自动细菌鉴定仪和哥伦比亚血琼脂均由法国生物梅里埃公司生产。
1.5方法
1.5.1菌悬液的配制挑取4~5个已分纯的菌落,接种于肉汤中增菌,6h后取3mL菌液通过比浊仪校正其浊度至0.5MacFarland,然后再用M-H肉汤稀释至1.5×105CFU/mL。
1.5.2微量肉汤稀释法将大蒜素和头孢哌酮的药物浓度依次倍比稀释,设置11个稀释浓度。按棋盘法设计,将不同浓度的大蒜素与抗菌药物两两组合后取50μL加入96孔平板中,再将1.5×105CFU/mL的菌液100μL加入孔中,37℃培养过夜。记录MIC值,计算(部分抑菌浓度指数)FIC指数,FIC指数=MIC甲药联用/MIC甲药单用+MIC乙药联用/MIC乙药单用。
1.5.3判读标准[4]FIC指数≤0.5时,两种药为协同作用;FIC指数为0.5~1.0,两种药为相加作用;l.02.0,两种药为拮抗作用。 |
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