【摘要】 目的 建立术后饮中橙皮苷含量的测定方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为CenturySIL C18-AQ(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液(21∶79),流速为0.8 mL/min,检测波长为284 nm,柱温为室温,进样量为20 μL。结果 橙皮苷浓度在1.004～10.04 μg范围内线性关系良好,平均回收率为98.59%,RSD＝0.72%。结论 方法简便、准确、重复性好,可作为术后饮中橙皮苷的含量测定方法。

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　　【关键词】王刚 ， 赵良存

　　　术后饮系甘肃武威肿瘤医院研制的医院制剂,是由太子参、白花蛇舌草、陈皮、甘草等药味制成的合剂,具有补气理气、行气宽中、降逆下气的功能,用于手术后气血亏虚所致的腑气不通诸症的治疗。经过临床多年使用,疗效显著。为控制其质量,参考文献[1-6],采用高效液相色谱(HPLC)法对方中君药陈皮的主要有效成分橙皮苷进行了含量测定,结果方法简便、准确、重复性好,为术后饮质量标准的研究与指标的制定提供了试验依据。

　　1  仪器与试药

　　SSI PC-2000型高效液相色谱仪,Model500紫外检测器,7725i手动进样阀,分析之星色谱工作站；XT120A电子分析天平(瑞士普利赛斯)；HS10260D超声波清洗器(天津市恒奥科技发展有限公司)。

　　橙皮苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号110721-200512,供含量测定用)；术后饮样品及缺陈皮的阴性对照样品均由甘肃武威肿瘤医院提供(批号060810,060812, 060815)。水为重蒸馏水,乙腈为色谱纯,聚酰胺为层析用试剂(80～100目),其余试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件

　　色谱柱：CenturySIL C18-AQ(250 mm×4.6 mm,5 μm,大连江申分离科学技术公司)；流动相：乙腈-0.2%磷酸溶液(21∶79)；流速：0.8 mL/min；检测波长：284 nm；柱温：室温；进样量：20 μL。在上述色谱条件下,橙皮苷与相邻峰达到基线分离,且阴性对照无干扰,峰形对称,分离效果良好。色谱图见图1。

　　2.2  对照品溶液的制备

　　精密称取橙皮苷对照品25.1 mg,置25 mL量瓶中,加甲醇适量,超声助溶,然后用甲醇溶解至刻度,摇匀,配成浓度为1.004 mg/mL的甲醇溶液,精密吸取2 mL置10 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液。

　　2.3  供试品溶液的制备学术论文发表

　　精密量取本品10 mL,置具塞锥形瓶中,加硅藻土5 g,搅拌均匀,烘干,精密加入甲醇120 mL,称定重量,充分搅拌,超声40 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液100 mL置蒸发皿中,水浴蒸干,残渣用70%乙醇100 mL使溶解并转移至分液漏斗中,加石油醚(60～90 ℃)萃取3次(50、30、20 mL),弃去石油醚液,分取70%乙醇液置蒸发皿中,蒸去乙醇,剩余水液上聚酰胺层析柱(1 cm×25 cm层析柱,称聚酰胺1.8 g,湿法装柱),先用20 mL水冲洗(6 mL/min),再加入70 mL甲醇冲洗,收集甲醇液水浴蒸干,残渣用甲醇溶解并定容至10 mL容量瓶中,用0.45 μm微孔滤膜过滤后备用。

　　2.4  线性关系考察

　　精密吸取上述橙皮苷浓度为1.004 mg/mL的甲醇溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL,分别置10 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,在上述色谱条件下分别进样20 μL,测定。以峰面积对浓度进行线性回归,得回归方程为：A＝27 248 838.6C＋91 201.7,r＝0.999 7。表明橙皮苷浓度在1.004～10.04 μg范围内线性关系良好。

　　2.5  精密度试验

　　精密吸取对照品溶液20 μL,重复进样5次,计算5次峰面积的RSD＝0.83%。

　　2.6  稳定性试验

　　取室温放置的对照品溶液,在上述色谱条件下,于0、1、2、4、8、24 h分别进样20 μL,测定峰面积的RSD＝0.71%,表明橙皮苷甲醇溶液在24 h内稳定。

　　2.7  重复性试验

　　精密量取供试品(批号060812)10 mL各5份,按“样品测定”项下操作,计算含量,结果分别为0.216 1、0.214 9、0.218 1、0.218 5、0.217 1 ㎎/mL,平均含量为0.216 9 mg/mL,RSD＝0.94%。